Le programme MeSeine Innovation a pour but l'identification et le développement de nouvelles méthodes de suivi en vue d'incorporation pérenne dans le réseau de mesure. Les méthodes basées sur les effets, couramment appelées bioessais, sont maintenant reconnues comme des approches nécessaires à l'abord intégral des pollutions modernes de l'eau, caractérisées par des mélanges complexes de substances généralement bioactives que les techniques historiques d'épuration ne permettent pas de traiter spécifiquement. Les besoins porteront sur : - L'activité physiologique/toxicité spécifique sur organismes aquatiques in situ ; - Les dysfonctionnements physiopathologiques sur organismes aquatiques ex vivo et in vitro ; - La toxicité générale et spécifique sur panels cellulaires in vitro

Activité physiologique/toxicité spécifique sur organismes aquatiques in situ

Ce lot porte sur la mesure de paramètres physiologiques et comportementaux sur organismes aquatiques encagés in situ. Les modèles privilégiés sont de type invertébrés amphipodes, ces derniers étant préconisés pour la détermination de NQE biotes en raison de leurs caractéristiques physiologiques et leur représentativité vis-à-vis de la faune aquatique Européenne. La mesure des divers paramètres devra être conduite en accord avec la norme AFNOR XT-T90-722

Activité physiologique/toxicité spécifique sur organismes aquatiques in situ

Ce lot porte sur la mesure de dysfonctionnements physiopathologiques spécifiques sur larves d'organismes aquatiques ou lignées références d¿organismes aquatiques ex vivo/in vitro. En particulier, il s¿agit de mesure les deux voies majeures de toxicité spécifique que sont la perturbation endocrinienne d¿une part et la génotoxicité d¿autre part, sur deux modèles pertinents dans l¿état de l¿art vis-à-vis des problématiques environnementales. Les mesures seront ainsi idéalement réalisées selon les normes AFNOR XP-T90-716-1/OCDE 248 et XP-T90-716-2 pour évaluer la perturbation endocrinienne thyroïdienne et oestrogénique, respectivement. La mise en évidence de lésions spécifiques au matériel génétique sera quant à elle principalement réalisée selon test de génotoxicité in vitro sur organismes aquatiques pertinents adapté de la norme OCDE 489 (test comète, objet de la norme OCDE 249). Une confirmation de l¿activation concomitante des réponses de réparation du génome est attendue en parallèle. Les méthodes suggérées sont les tests type Chromotest, objet de la norme ISO 13829, ou sa déclinaison SOS-Chromotest. D¿autres méthodes pourront être considérées au besoin, dans la mesure où ces dernières sous-tendront la méthode d¿investigation principale susmentionnée

Toxicité générale et spécifique sur panels cellulaires in vitro

Ce lot porte sur la mesure de phénomènes de toxicité générale et spécifiques détectés dans un panel expérimental in vitro (approches laboratoire dites en plaques). La toxicité générale sera abordée principalement via des méthodes de mesure de mortalité en culture ou élevage, par dénombrement et/ou utilisation de réactifs ou réactions mettant en évidence des altérations du métabolisme cellulaire. Des mesures concomitantes sur différents types d'organismes ou microorganismes en parallèle sont attendues en raison des considérations de spécificités et sensibilités des diverses cibles cellulaires aux mélanges de toxiques environnementaux. Les évènements d'activation ou inhibition des récepteurs cellulaires hormonaux stéroïdiens, correspondant à une toxicité spécifique, seront à investiguer d'autre part via des modèles cellulaires éprouvés dans le cadre de l'exploration de l'effet des polluants hormono-mimétiques aquatiques connus. Idéalement, les mesures devront suivre les méthodes de transactivation par transfection stable de cellules humaines décrites dans la norme OCDE Test 455 ; les cellules similaires non mentionnées dans le document seront acceptées dans la mesure d'une littérature suffisante et/ou d'un usage documenté sur des échantillons aqueux du milieu naturel. Seront aussi considérées dans ce cadre les cellules de levure des tests YES/YAS objets de la norme ISO 19040-1 :2018